搜索
您的当前位置:首页正文

罗格列酮对肺纤维化大鼠TGF—β1表达的影响

2024-08-21 来源:二三娱乐
维普资讯 http://www.cqvip.com 山东医药2008年第48卷第l9期 肝由于热缺血、冷缺血、再灌注损伤等诸多因素影 响,早期新肝功能明显下降,氯胺酮代谢缓慢,大鼠 术后苏醒时间相对延长,这不仅增加了呼吸抑制的 风险,更容易出现呼吸道分泌物堵塞。相反乙醚由 气道给药、易于代谢、无呼吸抑制等作用特点,就显 示出适合肝移植受体的麻醉要求,撤药后大鼠很快 射麻醉效果满意可靠,相反受体大鼠采用氯胺酮麻 醉手术死亡率却显著增高,因此受体大鼠在肝移植 手术中采用乙醚麻醉更安全可取。 [参考资料] [1]徐明清,姚榛祥,贺强.大鼠原位部分肝移植与围手术期处理的 技术改进[J].重庆医学,2003,32(2):135—136. [2]钱晓蜂,王学浩,张蜂,等.大鼠减体积肝移植模型的技术改进及 苏醒,减少了麻药长期作用的不利风险。因此肝移 再生的初步观察[J].南京医科大学学报(自然科学版),2003, 植受体大鼠采用乙醚开放吸人全麻是安全可取的。 23(3):221-223. 综上所述,正确的麻醉选择是大鼠肝移植动物 (收稿13期:2007—12-29) 模型成功建立的关键,供体大鼠采用氯胺酮腹腔注 罗格列酮对肺纤维化大鼠TGF一13 表达的影响 蒋莉 。张国俊h,邢丽华 ,陈奎生 ,高冠民 ,王华启 ,王建辉 (1郑州大学第一附属医院,河南郑州450052;2郑州大学医学院) [摘要] 将45只sD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,模型组和治疗组大鼠气管内一次性滴注博 莱霉素.A5(BLM.A5),对照组大鼠滴注等体积生理盐水。注药后治疗组灌服罗格列酮8 mg/(kg・d),对照组、模型 组给予等体积生理盐水。各组动物于7、14、28 d随机处死5只,取肺组织进行HE和Masson染色,免疫组化法检测 肺组织转化生长因子B (TGF—B )的表达水平。HE染色示治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化程度均较模型组轻; Masson染色示治疗组胶原沉积明显少于模型组。治疗组与模型组各时期TGF.B 表达水平均有统计学差异。提示 罗格列酮能减轻BLM.A5诱导的肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化,其机制可能与抑制肺组织TGF—B,表达有关。 [关键词]肺纤维化;博莱霉素;罗格列酮;转化生长因子- [中图分类号] R563 [文献标识码] B [文章编号] 1002-266X(2008)19-0041-02 肺间质纤维化是一组病因及发病机制尚不完全 北京中杉金桥生物技术有限公司。仪器:HPIAS- 明确的进行性肺疾病,是多种慢性肺疾病的共同结 1000高清晰度彩色病理图文分析系统。 局。转化生长因子-13 (TGF-13,)是已知最强的致纤 1.3方法 维化因子之一,可以促进成纤维细胞的增殖及胶原 1.3.1动物造模方法用1.5%戊巴比妥钠腹腔 沉积。罗格列酮是过氧化物酶体增殖物激活受体 注射麻醉(2.5 ml/kg)大鼠,仰卧固定于鼠台上,颈 (PPAR. )的合成配体,PPAR一 具有调节物质代谢、 部酒精消毒后逐层分离并暴露气管,注射器经气管 抗炎及抗纤维化作用。2007年3—6月,我们通过 软骨环间隙朝向心端刺人气管,然后缓慢注入0.3 博莱霉素诱导的大鼠肺间质纤维化模型,观察TGF一 ml博莱霉素生理盐水溶液(5 mg/kg),继续注入 13 在肺组织的表达情况,探讨罗格列酮对肺间质纤 0.3 ml的空气,注后立即将动物直立并左右旋转, 维化的影响。 使药液在肺内均匀分布。对照组大鼠同样方法注入 1材料与方法 等体积的生理盐水。 1.1动物雄性SD大鼠45只,体质量180—250 1.3.2动物分组和给药方法将大鼠随机分为模 (220 4-25)g,购自河南省实验动物中心。 型组、治疗组和对照组,每组15只。对照组:实验第 1.2药物与试剂博莱霉素.A5(BLM-A5,天津太 1天予气管内注人生理盐水,后连续用生理盐水灌 河药业有限公司),罗格列酮(文迪雅,葛兰素史克 胃至处死前一天。模型组:实验第1天予气管内注 公司),TGF-13 多克隆抗体及兔抗鼠sP试剂盒购自 入BLM-A5(5 mg/kg),后连续用生理盐水灌胃至处 死前一天。治疗组:实验第1天予气管内注人BLM- ‘通讯作者,E—mail:zgj@zgu.edu.cn A5(5 mg/kg),后连续用罗格列酮(8 mg/kg)灌胃至 41 维普资讯 http://www.cqvip.com

处死前一天。 1.3.3取材方法分别于造模7、l4、28 d取材,每 次各组随机处死5只,共45只。取肺脏固定于中性 福尔马林,常温保存备用。 1.3.4肺组织病理学检查HE染色观察肺泡炎 和肺纤维化,Masson染色观察胶原沉积。 1.3.5免疫组化检测TGF.B 的表达一抗为兔 抗鼠TGF,B 多克隆抗体,稀释度为1:200,按免疫 组化试剂盒说明书进行操作。以支气管黏膜上皮细 胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、成纤维细胞、血管 内皮细胞胞质内出现棕黄色颗粒为阳性反应。 1.3.6半定量图像分析 显微镜下观察细胞浆中 染成棕黄色颗粒者为阳性。采用HPIAS,1000高清 晰度彩色图文病理报告分析系统在高倍镜视野 (400 X)下随机取5个视野,测量各自阳性细胞中 阳性颗粒的平均光密度,计算各均值,作为该片的代 表值。 1.3.7统计学方法 采用SPSS 11.0统计软件包 进行统计学处理,各组数据均采用x±s表示,方差 齐采用单因素方差分析,方差不齐用非参数检验。 以P≤0.05为有统计学差异。 2结果 2.1肺组织形态学观察 ①肉眼观察:对照组各 时期双肺呈粉红色,弹性良好,肺表面光滑。模型组 7 d肺组织肿胀明显,肺表面可见片状出血点及淤 斑;14 d双肺灰白色,局部可见结节样改变;28 d肺 组织成苍白色,弹性降低,表面有结节样改变。治疗 组各时期表现较模型组减轻。②光镜观察:HE切 片显微镜下观察,对照组各时期肺支气管和肺泡结 构正常;模型组7 d肺泡腔及间隔内有炎性细胞渗 出,肺泡间隔增宽;14 d肺泡腔内炎性细胞渗出减 少,肺泡间隔内成纤维细胞增生;28 d肺泡结构破 坏,形成纤维化。治疗组各时期肺泡炎和肺纤维化 程度均较模型组轻。③肺组织胶原沉积情况:Mas— son染色切片显微镜下观察发现,模型组7 d肺泡腔 内见渗出物及炎性细胞;14 d炎性渗出减轻,肺泡 间隔内见成纤维细胞;28 d可见支气管壁及其周 围,血管周围及肺间质可见着蓝色胶原。治疗组胶 原沉积较模型组明显减轻。对照组未见胶原沉积。 2.2 TGF,B 表达肺组织中TGF—p 蛋白主要在 胞浆表达,并主要分布于支气管上皮细胞、肺泡巨噬 细胞、肺泡上皮细胞和肺成纤维细胞。各组肺组织 TGF.B 蛋白表达水平比较见表1。 3讨论 近年来罗格列酮降糖外的作用得到广泛研究, 其抗纤维化作用研究主要集中在肝、肾间质和心脏 42 山东医药2008年第48卷第l9期 表l各组肺组织TGF—gl蛋白表达水平 比较( ±s) 注:与对照组比较, P<0.01;与模型组比较, P<0.05,‘P< 0.O1;与同组前一时间段比较, P<0.01 的纤维化¨ J,而对肺问质纤维化研究较少。本研 究采用国际通用的气管内注入博莱霉素方法复制肺 问质纤维化模型。实验中观察到注入博莱霉素后随 着时间变化大鼠肺先经历肺泡炎阶段渐变为肺间质 纤维化阶段,Masson染色也发现从第l4天开始支 气管、血管及肺问质出现胶原沉积,第28天胶原沉 积达高峰,这些均说明复制动物模型成功。肺组织 病理学无论大体观察还是HE染色、Masson染色光 镜观察发现治疗组肺泡炎及肺纤维化程度均较模型 组减轻,说明罗格列酮能减轻肺泡炎和肺纤维化程 度,与Genovese等 的研究一致。 TGF.B 是目前肺纤维化研究热点和重要的药 物作用靶点。TGF.B 可以促进成纤维细胞增殖和 聚集,还可促使成纤维细胞表型向成肌纤维细胞表 型转化,影响ECM的形成和降解。本研究发现模型 组肺组织TGF—B,表达较正常组明显升高,第l4天 达高峰,说明TGF—B 参与肺泡炎的形成及在肺间 质纤维化发生发展中起重要作用。本研究中治疗组 各时期TGF,B,表达与模型组相比差异有显著性, 其中第l4天第28天差异有极显著性,随着用药时 间延长,TGF,B 降低越明显,至第28天TGF—p表达 与对照组接近,推测罗格列酮可能是通过抑制TGF— B,表达减轻肺泡炎和肺纤维化程度。由于TGF—p 表达在早期即开始升高,推测早期用药干预TGF—B 的表达较晚期用药效果好。 [参考文献] [1]I出 M,Touyz RM,Viel EC,et a1.Peroxisome pmliferator・activa— ted receptor—a and receptor一 activators prevent cardiac fibrosis in mineralocorticoid-dependent hypertension[J].Hypertension, 2003,42(4):737-743. [2]CMkin AC,Giunti S,Jandeleit—Dahm KA,et a1.PPAR—o[and 1 ag- onists attenuate diabetic kidney idse ̄e in the apolipopmtein E knock— out mouse[J].Nephrol Dial Trnasplnat,2OO6,21(9):2399-2405. [3]Leclercq IA,Sempoux C,Starkel P,et a1.Limitde therapeutic effi— cacy of pioglitazone on pmgressionof hepatic fibrosis in rats[j]. Gut,2006,55(7):1020・1029. [4]Genovese T,Cuzzocrea S,Di Paola R.et a1.Effect of rosiglitazone nad 15-deoxy・Deltal2,14・prostaglnadin J2 on blenmyein・induced lung injury[J].Eur Respir J,2005,25(2):225・234. (收稿日期:2008-03-01) 

因篇幅问题不能全部显示,请点此查看更多更全内容

Top